Abstract The hydro-alcoholic extract from Calendula officinalis petals, was evaluated showing beneficial effects against oxidative stress and therefore on diseases associated to inflammatory processes. The content of polyphenols of the extract was determined by TLC and HPLC-UV-DAD and the antioxidant efficiency estimated from Fe3+/Fe2+ reducing power, Cu2+ and Fe2+ chelation, •OH radical scavenging, ABTS ENT#091;2, 2´-azino bis (3 ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)ENT#093; and DPPH (2,2´diphenyl-1-picrylhydrazyl) assays. The in vitro growth inhibition (IC50) in human cancer cell breast (MDA-MB-231), uterine cervix (HeLa), lung (A-549), colon (HT-29) and (Caco-2) was determined by MTT method. The extract showed that the polyphenols content in the hydro-alcoholic extract was 37.01±0.015 mg GAE g-1, being rutin the most abundant one. ABTS TEAC and DPPH TEAC tests showed a high antioxidant capacity. The antioxidant activity profile displayed high reducing capacity and ability to chelate Cu2+ and Fe2+ as well as a •OH radical good scavenging capacity. The extract showed a cytotoxic effect on human cancer cell lines of colon (HT-29) and (Caco-2) breast (MDA-MB-231), uterine cervix (HeLa), and lung (A-549) (IC50 = 10.84, 11.73, 11.26, 11.53, and 11.96 µg mL-1, respectively). The correlation analysis suggests that the Calendula officinalis polyphenols are directly related to the antioxidant efficiency of the extract and inversely to the cell viability.

Resumen Se evaluó el extracto hidroalcohólico de los pétalos de Calendula officinalis, mostrando efectos benéficos contra el estrés oxidativo y enfermedades asociadas a procesos inflamatorios. El contenido de polifenoles del extracto fue determinado por TLC y HPLC-UV-DAD y la capacidad antioxidante se estimó del poder reductor de Fe3+/Fe2+, quelación de Cu2+ y Fe2+, eliminación de radicales •OH, y ensayos ABTS ENT#091;2, 2´-azino-bis (3 etilbenzotiazolin-6-sulfónico) y DPPH (2,2´difenil-1-picrilhidracilo). La inhibición del crecimiento in vitro (IC50) en células cancerosas humanas de mama (MDA-MB-231), de cuello uterino (HeLa), pulmón (A-549), y colon (HT-29 y Caco-2) fue determinado por el método de MTT. El extracto mostró que el contenido total de polifenoles fue de 37.01±0.015 mg GAe g-1, siendo la rutina la más abundante. Las pruebas ABTS TEAC y DPPH TEAC mostraron una alta capacidad antioxidante. El perfil de actividad antioxidante mostró buena capacidad reductora y capacidad para quelar Cu2+ y Fe2+, así como una buena capacidad de eliminación de radicales •OH. El extracto también mostró efecto citotóxico en células de colon (HT-29 y Caco-2), de mama (MDA-MB-231), de cuello uterino (HeLa) y pulmón (A-549) (IC50 = 10.84, 11.73, 11.26, 11.53 y 11.96 μg/ mL-1, respectivamente). El análisis de correlación sugiere que los polifenoles de Calendula officinalis están directamente relacionados con la capacidad antioxidante del extracto y se asocian inversamente con la viabilidad celular.

Background: ENSANUT 2012 showed a combined prevalence of overweight and obesity of 34.4% in Mexican children. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) of the ADIPOQ and ADIPOR2 genes have been reported in many populations, but their association with obesity has not been confirmed in other studies. Our aim was to determine the association of SNPs from ADIPOQ and ADIPOR2 genes with obesity in Mexican children. Methods: A total of 2,634 children from 6 to 12 years old were enrolled in the study from four IMSS Units in Mexico City. We selected 1,469 unrelated children (745 normal weight and 724 overweight/obese). Phenotype characterization included anthropometric measurements, blood pressure, biochemical parameters, insulin concentrations and presence of acanthosis nigricans (AN). Analysis of the SNPs rs182052, rs266729, rs2241766, rs822393 of ADIPOQ and rs11061971 of ADIPOR2 was carried out in the DNA samples. Results: The study showed significant differences (p <0.05) between groups in waist circumference, blood pressure, presence of AN, insulin concentrations, HOMA-IR, fasting glucose and lipid parameters, being higher in obese children. No associations in ADIPOQ variants with the presence of overweight/obesity were found. The presence of the variant rs11061971 of ADIPOR2 in children had a significant association with protection of overweight/obesity (OR 0.79, 95% CI 0.68-0.93, p = 0.003). Also, the log-additive model confirmed the association by codominant and dominant models (p <0.05). Conclusions: The presence of rs11061971 of ADIPOR2 variant confers protection against obesity and could be used as a marker in Mexican children.

Introducción: ENSANUT 2012 mostró una prevalencia combinada de sobrepeso y obesidad en el 34.4% en niños mexicanos. Se han reportado polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) de los genes ADIPOQ y ADIPOR2 en varias poblaciones, pero su asociación con la obesidad ha sido controversial. El objetivo de este trabajo fue determinar la asociación de SNP de ADIPOQ y ADIPOR2 con obesidad en una muestra de niños mexicanos. Métodos: Un total de 2,634 niños de 6-12 años se inscribieron en el estudio en cuatro unidades del Instituto Mexicano del Seguro Social en la Ciudad de México. Se seleccionaron 1,469 niños no emparentados (745 peso normal y 724 sobrepeso/obesidad). Se les tomaron medidas antropométricas, presión arterial, parámetros bioquímicos, insulina y presencia de acantosis nigricans (AN). El análisis de los SNP (rs182052, rs266729, rs2241766, rs822393 de ADIPOQ y rs11061971 de ADIPOR2) se realizó en muestras de ADN. Resultados: Se observaron diferencias significativas (p < 0.05) entre los grupos en la circunferencia de cintura, presión arterial, AN, insulina, HOMA-IR, glucosa en ayunas y parámetros lipídicos siendo elevados en los niños obesos. No se encontró asociación en variantes ADIPOQ con la presencia de sobrepeso/obesidad. La presencia de rs11061971 de ADIPOR2 tuvo una asociación significativa con la protección de sobrepeso/obesidad (OR de 0.79; IC95% 0.68 a 0.93, p = 0.003). El modelo Log-aditivo confirmó la asociación de los modelos codominante y dominante (p < 0.05). Conclusiones: La presencia de la variante rs11061971 de ADIPOR2 confiere protección contra la obesidad, y podría utilizarse como marcador en niños mexicanos.

OBJECTIVE: To investigate whether the HlyA-induced vacuolating effect is produced by V. cholerae O1 ElTor strains isolated from different geographic origins, including Mexico. MATERIAL AND METHODS: Supernatant-induced haemolysis, vacuolating activity and cytotoxicity in Vero cells were recorded. PCR, RFLP analysis and molecular cloning were performed. RESULTS: All ElTor strains analyzed induced cellular vacuolation. Ribotype 2 strains isolates from the U.S. gulf coast yielded the highest titer of vacuolating activity. Eight of nine strains were haemolytic, while all strains were PCR positive for the hlyA gene. We cloned the hlyA gene from two ElTor strains, a toxigenic (2514-88, ctxAB+) and a non-toxigenic Mexican strain (CM 91-3, ctxAB-). Supernatant from those recombinant E. coli strains induced haemolysis, cell vacuolation and cytotoxicity. RFLP-PCR analysis revealed similarities in the hlyA gene from all strains tested. CONCLUSION: The HlyA-induced vacuolating effect is a widespread phenotype of epidemic V. cholerae O1 ElTor strains.

OBJETIVO: Analizar el efecto vacuolizante de cepas de V. cholerae O1 ElTor aisladas de diferente origen geográfico, incluyendo México. MATERIAL Y MÉTODOS: Se realizaron pruebas de hemolisis, vacuolización y citotoxicidad en células Vero, así como PCR, análisis por RFLP y clonación molecular. RESULTADOS: Todas las cepas indujeron el efecto vacuolizante. Las cepas del ribotipo 2, aisladas de las costas del Golfo en Estados Unidos, presentaron títulos altos de vacuolización. El gen hlyA fue amplificado en las nueve cepas mediante PCR, aunque sólo ocho fueron hemolíticas. Se clonó el gen hlyA de una cepa toxigénica (2514-88, ctxAB+) y de una cepa no toxigénica aislada en México (CM 91-3, ctxAB-). El sobrenadante de las clonas recombinantes indujo hemólisis, efecto vacuolizante y citotoxicidad. El RFLP mostró alta similitud del gen hlyA de las cepas estudiadas. CONCLUSIÓN: El efecto vacuolizante es un fenotipo ampliamente distribuido en cepas epidémicas de V. cholerae O1 biotipo ElTor.

OBJECTIVE: To investigate whether the HlyA-induced vacuolating effect is produced by V. cholerae O1 ElTor strains isolated from different geographic origins, including Mexico. MATERIAL AND METHODS: Supernatant-induced haemolysis, vacuolating activity and cytotoxicity in Vero cells were recorded. PCR, RFLP analysis and molecular cloning were performed. RESULTS: All ElTor strains analyzed induced cellular vacuolation. Ribotype 2 strains isolates from the U.S. gulf coast yielded the highest titer of vacuolating activity. Eight of nine strains were haemolytic, while all strains were PCR positive for the hlyA gene. We cloned the hlyA gene from two ElTor strains, a toxigenic (2514-88, ctxAB+) and a non-toxigenic Mexican strain (CM 91-3, ctxAB-). Supernatant from those recombinant E. coli strains induced haemolysis, cell vacuolation and cytotoxicity. RFLP-PCR analysis revealed similarities in the hlyA gene from all strains tested. CONCLUSION: The HlyA-induced vacuolating effect is a widespread phenotype of epidemic V. cholerae O1 ElTor strains.

OBJETIVO: Analizar el efecto vacuolizante de cepas de V. cholerae O1 ElTor aisladas de diferente origen geográfico, incluyendo México. MATERIAL Y MÉTODOS: Se realizaron pruebas de hemolisis, vacuolización y citotoxicidad en células Vero, así como PCR, análisis por RFLP y clonación molecular. RESULTADOS: Todas las cepas indujeron el efecto vacuolizante. Las cepas del ribotipo 2, aisladas de las costas del Golfo en Estados Unidos, presentaron títulos altos de vacuolización. El gen hlyA fue amplificado en las nueve cepas mediante PCR, aunque sólo ocho fueron hemolíticas. Se clonó el gen hlyA de una cepa toxigénica (2514-88, ctxAB+) y de una cepa no toxigénica aislada en México (CM 91-3, ctxAB-). El sobrenadante de las clonas recombinantes indujo hemólisis, efecto vacuolizante y citotoxicidad. El RFLP mostró alta similitud del gen hlyA de las cepas estudiadas. CONCLUSIÓN: El efecto vacuolizante es un fenotipo ampliamente distribuido en cepas epidémicas de V. cholerae O1 biotipo ElTor.